超级白细胞介素-6重组慢病毒的构建及其对肝细胞的促增殖作用

作者：孙文静; 秦波; 黄涛; 黄爱龙

来源：中华肝脏病杂志, 2009, (08): 615-619.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2009.08.013

• 肝细胞
• 白细胞介素6
• 慢病毒属
• 触珠蛋白类

目的观察超级白细胞介素-6重组慢病毒对人正常肝细胞L-02的促增殖作用。方法利用慢病毒表达质粒及其包装系统构建超级白细胞介素-6重组慢病毒(FIV Hyper-IL 6)、IL-6重组慢病毒(FIV-IL-6)和空慢病毒载体(FIV),用嘌呤霉素筛选的方法测定其病毒滴度。将人肝细胞L-02分为4组:FIV-Hyper IL-6组、FIV-IL-6组、FIV组及未感染组,各组分别感染其相应的重组慢病毒,采用四甲基偶氮唑盐法检测其对L-02细胞生长状态的影响;并用RT PCR法检测重组慢病毒感染L-02细胞后产生的急性时相蛋白-结合珠蛋白mRNA表达量的变化。应用方差分析进行统计学分析。结果构建出的各重组慢病毒能成功感染靶细胞,嘌呤霉素筛选法测得的各重组慢病毒的病毒滴度均为10~7pfu/ml。病毒颗粒感染L-02细胞后48 h,细胞的促增殖作用(A值)FIV Hyper-IL 6组为0.6267±0.0256,FIV-IL-6组、FIV组及未感染组分别为0.5563±0.0112、0.5040±0.0078、0.4790±0.0201,F=41.09,P值均<0.01,且随着时间的延长,对细胞的促增殖作用有所增加,并于感染后72 h达到最高,为0.8000±0.0166。FIV-Hyper-IL6组细胞结合珠蛋白mRNA吸光度值为0.7030±0.0106,FIV-IL-6组、FIV组及未感染组分别为0.3355±0.0093、0.1143±0.0153、0.1145±0.0076,q=57.5007,P值均<0.01。结论构建的Hyper IL 6重组慢病毒能够显著刺激L02细胞表达结合珠蛋白,对L 02细胞有较强的促增殖作用。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院