幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A蛋白不同片段对胃癌细胞γH2AX表达的影响

作者：贾岑岑; 王琴容; 周建奖; 程薇; 赵艳^*

来源：贵州医科大学学报, 2022, 47(02): 133-140.

DOI：10.19367/j.cnki.2096-8388.2022.02.002

• 螺杆菌,幽门
• 胃肿瘤
• 细胞周期
• 细胞毒素相关基因A蛋白
• DNA损伤
• 磷酸化组蛋白H2AX

目的 探讨幽门螺杆菌(H. pylori)细胞毒素相关基因A (Cag A)蛋白不同片段对胃癌细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达的影响。方法 取前期分离的H. pylori东亚株GZ7及其Cag A敲除株H. pylori GZ7ΔCag A感染的癌细胞株AGS，采用免疫荧光方法检测DNA双链断裂标志物γH2AX的表达;构建不同序列的Cag A表达载体(载体a、b、c、d、e)，转化大肠杆菌，提取质粒后测序鉴定，将鉴定后的载体转染AGS，采用免疫荧光方法检测γH2AX的表达，并通过流式细胞术检测细胞周期。结果 成功鉴定了含不同片段的Cag A载体; H.pylori GZ7感染的胃癌细胞AGS核内γH2AX的表达高于H. pylori GZ7ΔCag A感染的细胞(P <0.05);与NC组比较，不同序列Cag A载体转染后胃癌细胞AGS中γH2AX表达均有增加(P <0.05或P <0.01)，且载体b、c及d表达增加较明显(P <0.01);载体a和c转染后的胃癌细胞AGS的G0/G1期细胞比例升高(P <0.05)，载体b、c、d及e转染后胃癌细胞AGS的G2/M期比例明显升高(P <0.01)。结论 Cag A是H. pylori感染诱导胃癌细胞DNA双链断裂的重要因素，Cag A中的EPYIA基序是这种DNA损伤的重要结构。

• 单位
  贵州医科大学