TACO cDNA的克隆、表达及TACO的F肌动蛋白交联作用

作者：刘长振; 李湘辉; 隋森芳

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2005, (06): 53-57.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2005.06.009

• TACO
• 克隆与表达
• 肌动蛋白纤维交联 TACO
• clone and expression
• F-actin cross-linking

为进一步研究TACO(tryptophan-aspartate-containing coat protein)的性质、功能及它与肌动蛋白之间的相互关系,利用逆转录PCR技术扩增出TACO的cDNA序列,并将其克隆到pGEX2T表达质粒上.重组表达质粒pGEX2TTACO在宿主菌BL21中得到稳定表达.表达产物经GlutathioneSepharoseTM亲和纯化得到融合蛋白GSTTACO.肌动蛋白纤维(Factin)结合共沉淀实验证明,融合蛋白GSTTACO保持了天然TACO蛋白的F肌动蛋白结合活性.利用肌动蛋白纤维交联(Factincrosslinking)实验和电镜技术发现,纯化后的GS...