摘要
目的:探究熄风化湿方对腹泻型肠易激综合征(diarrheal irritable bowel syndrome, IBS-D)内脏高敏感性大鼠的作用及其机制。方法:从40只SPF级雄性Wistar大鼠中随机选取10只作为空白组,其余30只大鼠采用“母婴分离+乙酸刺激”法建立IBS-D模型。将建模成功的IBS-D大鼠随机分成模型组、低剂量熄风化湿方组(10.9 g·kg-1)和高剂量熄风化湿方组(43.6 g·kg-1),每组10只,低、高剂量熄风化湿方组大鼠灌胃给予10 mL·kg-1的熄风化湿方溶液,空白组和模型组大鼠灌胃给予等体积蒸馏水,每天1次,给药2周。收集各组大鼠粪便,检测粪便含水率;检测大鼠腹部抬起和背部拱起所需注水量评价大鼠内脏敏感性;HE染色检测大鼠结肠组织病理变化;ELISA法检测血清生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide, Ghrelin)、胆囊收缩素(cholecystokinin, CCK)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及IL-2的水平;免疫荧光染色检测肠黏膜γδT细胞数量;Western Blotting检测酪氨酸蛋白激酶(tyrosine-protein kinase, Jak)、信号转导激活转录因子(signal transducer activated transcription factor, Stat)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠腹部抬起和背部拱起所需注水量明显降低(P<0.05);粪便含水率及血清Ghrelin、CCK、IL-1β水平显著上升(P<0.05),IL-2水平显著降低(P<0.05);肠黏膜γδT细胞数量及结肠组织Jak、Stat蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,低、高剂量熄风化湿方组大鼠腹部抬起和背部拱起所需注水量明显升高(P<0.05);粪便含水率及血清Ghrelin、CCK、IL-1β水平显著降低(P<0.05),IL-2水平显著上升(P<0.05);肠黏膜γδT细胞数量及结肠组织Jak、Stat蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。HE染色发现,模型组大鼠结肠组织固有层有明显中性粒细胞浸润,间质水肿严重,腺体排列紊乱,边界不清晰,黏膜下层可见血管增生;低、高剂量熄风化湿方组大鼠结肠组织病理改变得到显著改善。结论:熄风化湿方能有效改善IBS-D大鼠内脏敏感性,调节脑肠肽水平,改善免疫功能,其作用可能与Jak/Stat信号通路的调控有关。
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单位淄博市中心医院