CircCSNK1G1调节miR-381-3p/BRD4轴对喉癌细胞恶性生物学行为的影响

作者：董静; 陈显权^*

来源：现代肿瘤医学, 2023, 31(13): 2417-2424.

• CircCSNK1G1
• miR-381-3p/BRD4轴
• 喉癌
• 恶性生物学行为

目的:探讨CircCSNK1G1调节miR-381-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴对喉癌(laryngeal cancer, LC)细胞恶性生物学行为的影响。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、western blot分别检测60例LC患者癌组织、癌旁组织及喉上皮细胞NP69及人LC细胞Hep-2、Tu212、M4E中CircCSNK1G1、miR-381-3p、BRD4蛋白表达；将人喉癌Hep-2细胞分为：control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircCSNK1G1组(转染si-CircCSNK1G1)、si-CircCSNK1G1+inhibitor-NC组(si-CircCSNK1G1和inhibitor-NC共转染)、si-CircCSNK1G1+miR-381-3p inhibitor组(si-CircCSNK1G1和miR-381-3p inhibitor共转染);RT-qPCR检测Hep-2细胞中CircCSNK1G1、miR-381-3p的表达水平；MTT法检测Hep-2细胞增殖；划痕实验检测Hep-2细胞迁移；Transwell小室检测Hep-2细胞侵袭；流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡；western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及BRD4蛋白的表达；双荧光素酶报告基因实验分别验证CircCSNK1G1和miR-381-3p、miR-381-3p和BRD4的关系。结果:在LC组织和LC细胞中，CircCSNK1G1、BRD4蛋白高表达，miR-381-3p低表达，且在Hep-2细胞中CircCSNK1G1、BRD4蛋白水平最高，miR-381-3p表达最低(P<0.05),因此，选择Hep-2细胞进行转染；与control组、si-NC组比较，si-CircCSNK1G1组Hep-2细胞中CircCSNK1G1表达、OD490值、划痕愈合率、侵袭数、PCNA、MMP-2、Bcl-2、BRD4蛋白表达显著降低，miR-381-3p、凋亡率、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);与si-CircCSNK1G1组、si-CircCSNK1G1+inhibitor-NC组比较，si-CircCSNK1G1+miR-381-3p inhibitor组Hep-2细胞中OD490值、划痕愈合率、侵袭数、PCNA、MMP-2、Bcl-2、BRD4蛋白表达显著升高，miR-381-3p、凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);CircCSNK1G1靶向调控miR-381-3p表达，miR-381-3p靶向负调控BRD4表达。结论：敲低CircCSNK1G1可能通过靶向miR-381-3p来下调BRD4表达，进而抑制Hep-2细胞增殖、迁移、侵袭，促进其凋亡。

• 单位
  中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院