摘要
目的:本研究论证肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞中tRNA-ValAAC-5表达发挥作用及机制。方法:使用Real-time PCR法检测tRNA-ValAAC-5在人正常细胞肝癌细胞(THLE2,THLE3)和HCC细胞株(Hep3B, HuH7, SNU398, Hep3G2)和中的表达。Hep3B和Hep3G2细胞分别转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor及对照tRNA-ValAAC-5-NC即为inhibitor组和NC组。两组细胞分别通过CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞侵袭转移能力,Western blot法检测p21、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达。结果:相较于THLE2、THLE3细胞,tRNA-ValAAC-5在Hep3B、HuH7、SNU398、 Hep3G2细胞中相对表达量均有升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与tRNAValAAC-NC相比,转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor的Hep3B、Hep3G2细胞tRNA-ValAAC-5表达均明显降低,两组差异有统计学意义(t=36.52、27.45,P<0.001),表示转染成功。与tRNA-ValAAC-5-NC相比,Hep3B、Hep3G2细胞转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor后24、48、72、96 h增殖能力受到抑制,差异均有统计学意义(t=5.25、8.23、7.33、14.16,P<0.001)、(t=4.25、5.11、9.39、7.59,P<0.001)。转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor组Hep3B、Hep3G2细胞侵袭转移减少,两组差异有统计学意义(t=14.01、21.85,P<0.001)。转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor组Hep3B和Hep3G2细胞p21表达升高、MMP2和MMP9的表达量降低,差异均有统计学意义(t=8.96、12.80、4.652,P<0.01)、(t=15.17、22.36、12.61,P<0.01)。结论:tRNA-ValAAC-5能够有效促进肝癌增殖,侵袭和转移,其可能的作用机制与调控p21、MMP2和MMP9的表达有关。
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