膜蛋白LRRC8A在小鼠心肌细胞的表达及电生理特性

作者：刘艳; 许荣; 郭筱王; 霍聪; 黎星; 李东韬; 夏跃胜; 贾新; 王晓明

来源：中华老年心脑血管病杂志, 2018, 20(07): 746-751.

• 肌细胞,心脏
• 膜片钳术
• 电生理学
• 氯化物通道

目的探讨容积敏感性氯通道蛋白主要成分LRRC8A在小鼠心肌细胞的表达及电生理特性。方法采用原代培养的小鼠乳鼠心肌细胞,上海吉玛公司合成4个不同LRRC8A的小干扰RNA(siRNA),片段依次为A组、B组、C组和D组,另将1个不包含siRNA的片段作为NC组。将含LRRC8AsiRNA片段的腺病毒感染心肌细胞,用等渗、低渗、低渗加DCPIB、低渗加siRNA外液灌流。RT-PCR法和Western Blot法检测各组LRRC8A在心肌细胞的表达;应用膜片钳检测各种状态下LRRC8A电生理特性(ICl,vol)的变化。结果心肌细胞能正常表达LRRC8A,腺病毒成功感染细胞后,与NC组比较,A、B、C和D组LRRC8A mRNA及蛋白表达量均降低(P<0.05)。与等渗外液比较,低渗外液ICl,vol明显升高,与低渗外液比较,低渗加DCPIB外液的ICl,vol降低,抑制率达到(96.48±2.63)%(P<0.01),与低渗外液比较,低渗加siRNA外液的电流密度值下降达(83.04±8.41)%(P<0.01)。结论 LRRC8A是小鼠心肌细胞膜重要的组成成分,是容积敏感性氯通道的重要构成蛋白。

• 单位
  中国人民解放军海军总医院; 陕西省人民医院; 中国人民解放军空军军医大学