长链非编码RNA MEG3靶向miR-21对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭和迁移的影响

作者：徐大伟^*; 马鹏举; 高**; 黄立勇; 王仲伟; 金保哲; 周文科

来源：肿瘤学杂志, 2019, 25(06): 524-530.

• 胶质瘤
• U251
• 增殖
• 侵袭
• 迁移

[目的]探究长链非编码RNA人母系表达基因3 (maternally expressed gene 3,MEG3)对人胶质瘤细胞U251增殖、侵袭和迁移能力的影响及机制。[方法] RT-PCR检测MEG3和miR-21在胶质瘤组织、癌旁组织中、正常星形胶质细胞NHAs和胶质瘤细胞U251中的表达;用pcDNA-MEG3 (pc-MEG3)转染U251细胞,RT-PCR检测MEG3和miR-21的表达;生物信息及荧光素酶报告实验预测并验证MEG3和miR-21的关系;MTT检测细胞增殖能力,Transwell和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;免疫印迹检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的表达。[结果]与癌旁组织比较,MEG3在胶质瘤组织中表达水平明显降低(t=23.169,P<0.001),miR-21水平明显升高(t=14.965,P=0.002);与NHAs组比较,U251组细胞MEG3表达水平明显降低(t=13.145,P<0.001),miR-21表达水平显著升高(t=12.483,P <0.001);pcMEG3能显著上调MEG3的表达水平并抑制miR-21表达(t=8.129,P<0.001;t=11.705,P<0.001);miR-21 mimic能显著促进miR-21表达并能降低MEG3野生质粒(MEG3 wt)的活性(t=6.460,P<0.001;t=7.742,P=0.004);pc-MEG3能显著降低U251细胞增殖倍数和PCNA的表达水平(F=96.45,P<0.001;t=5.337,P<0.001),miR-21 mimic能显著减弱pc-MEG3对细胞增殖及PCNA表达的抑制作用(t=7.073,P<0.001;t=4.609,P<0.001);同时,pc-MEG3还能显著降低U251细胞的划痕闭合率和侵袭细胞数(t=5.014,P<0.001;t=10.664,P<0.001),并抑制MMP-2和MMP-9的表达(t=3.360,P=0.007;t=3.453,P=0.006);miR-21 mimic能明显减弱pc-MEG3对细胞侵袭、迁移及MMP-2和MMP-9表达的抑制作用(t=2.498,P=0.032;t=4.298,P=0.002;t=4.612,P<0.001;t=5.137,P<0.001)。[结论] MEG能通过靶向miR-21减弱胶质瘤U251细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

• 单位
  新乡医学院第一附属医院