WISP1对百草枯诱导肺泡细胞上皮间质转化和基质金属蛋白酶-9表达的影响

作者：刘景艳; 余坤城; 谭昌锐

来源：中国工业医学杂志, 2023, 36(05): 396-481.

DOI：10.13631/j.cnki.zggyyx.2023.05.003

• 百草枯(PQ)
• 细胞上皮间质转化(EMT)
• WNT1诱导信号通道蛋白1(WISP1)
• 基质金属蛋白酶-9(MMP-9)
• E-钙黏蛋白(E-Cadherin)
• 波形蛋白(Vimentin)

目的 观察百草枯(PQ)对人肺A549细胞WNT1诱导信号通道蛋白1(WISP1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响，探讨WISP1在PQ诱导肺泡细胞上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法 体外培养A549细胞，采用不同浓度PQ染毒，光学显微镜下观察细胞形态学改变，实时荧光定量PCR方法检测A549细胞中E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、WISP1及MMP-9的表达，Western blot测定E-Cadherin、Vimentin、WISP1和MMP-9蛋白表达。结果 (1)PQ染毒后A549细胞形态发生改变，细胞体积增大，空泡增多，随着PQ染毒浓度增加细胞出现凋亡。(2)伴随细胞形态改变，E-Cadherin水平随PQ染毒浓度增加而降低，以200μg/ml PQ时最低(P<0.01);Vimentin浓度增加，以50μg/ml PQ时最高(P<0.01)。(3)随着PQ染毒浓度增加，WISP1、MMP-9基因和蛋白表达升高，200μg/ml PQ染毒后第5天WISP1、MMP-9表达达到高峰(P<0.01)。(4)经WISP1 siRNA处理后200μg/ml PQ诱导细胞的EMT现象减少，E-Cadherin表达较空白siRNA升高(P<0.01),Vimentin浓度下降(P<0.01),WISP1和MMP-9表达降低(P<0.01),两者的降低呈正相关(r=0.986,P<0.01)。结论 WISP1可能参与了PQ诱导的EMT过程，WISP1水平降低抑制了PQ诱导的MMP-9表达。因而推测WISP1与MMP-9可能在PQ所致肺纤维化过程中发挥了作用。

• 单位
  深圳市龙岗区人民医院