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摘要
目的 ：基于网络药理学和分子对接探讨桃红四物汤治疗慢性胆囊炎的机制，为新药研发节约成本，使实验更具有针对性。方法 ：通过TCMSP数据库寻找药物有效成分，在wiss Target Prediction中预测其对应的靶点，再通过Gene Cards数据库预测慢性胆囊炎的靶点，建立药物和疾病的靶点数据库后绘制PPI网络图、药物成分-靶点图以及GO、KEGG富集分析。根据度值，筛选出核心成分的靶点，再做分子对接验证两者结合情况，最后通过脂多糖刺激人胆囊上皮细胞诱导炎症，使用ELISA试剂盒检测上清液炎症介质的浓度，在使用不同浓度THSWD处理后，采用Western blot法检测AKT和p-AKT的表达。结果 ：筛选了桃红四物汤49个活性成分共计3,262个潜在靶点，去重后获得了665个潜在靶点；疾病靶点共681个。GO富集分析结果显示靶蛋白主要参与平滑肌细胞增殖、MAPK级联反应、炎症反应、蛋白激酶B信号的调控等。KEGG富集分析发现靶点参与了140条通路，主要涉及AGERAGE信号通路、HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路等。根据度值筛选的核心靶点为AKT1、TNF、TP53、VEGFA、IL-1B，核心成分为山柰酚、木犀草素、槲皮素。选择了度值最高的AKT1和山柰酚进行了分子对接，并将结果可视化。CCK-8实验结果表明12.5μg/m L和25μg/m L的THSWD对胆囊上皮细胞无明显毒性作用，Elisa法检测结果发现使用脂多糖刺激后白介素-6水平显著升高，而使用THSWD处理后其水平明显下降。Western blot结果显示LPS诱导组p-AKT表达升高，THSWD处理组p-AKT表达下降。结论 ：本研究基于网络药理学、分子对接和细胞实验首次发现了桃红四物汤对慢性胆囊炎的治疗有效，且AKT1和山柰酚可能分别是其靶点和有效成分之一。
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