摘要
为了探究番茄红素在解脂耶氏酵母中的生物合成,利用两个解脂耶氏酵母整合表达质粒(单拷贝质粒pINA1269和多拷贝质粒pINA1312),将成团泛菌来源的番茄红素生物合成基因(crtE、crtB、crtI)克隆到解脂耶氏酵母营养缺陷型宿主菌Po1f中实现多基因共表达,并成功构建了异源合成番茄红素的解脂耶氏酵母工程菌株。在hp4d启动子和XPR2终止子的控制下,本实验共构建了8个能产番茄红素的解脂耶氏酵母工程菌株;同时筛选了其中5个代表性菌株(Po1f-1269IBE-1312、Po1f-1312E-1269IB、Po1f-1312B-1269IE、Po1f-1312I-1269EB、Po1f-1312IBE-1269)基于摇瓶培养进一步研究其生长特性和产物合成情况。结果表明,工程菌Po1f-1312E-1269IB的培养可以获得最高番茄红素产量,相对于细菌干重其产量约为0.9mg/g。
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单位华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室; 生物工程学院