葛根素通过上调Wnt/β-catenin信号通路改善化疗诱导的雌性生殖干细胞的氧化应激损伤和凋亡

作者：迪丽努尔·安外尔; 热孜宛古丽·约麦尔; 陆萍^*

来源：中国医院用药评价与分析, 2023, 23(04): 420-430.

DOI：10.14009/j.issn.1672-2124.2023.04.008

• 葛根素
• 雌性生殖干细胞
• 氧化应激
• 凋亡

目的：探讨葛根素(PUE)对化疗诱导的雌性生殖干细胞(FGSCs)氧化应激损伤和凋亡的影响及相关机制。方法：分离并鉴定乳鼠卵巢表层上皮的原代FGSCs,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测PUE对FGSCs增殖活力的影响。将FGSCs分为对照组(Control)、白消安(BU)组、BU+PUE组和BU+PUE+DKK-1组；采用CCK-8法检测各组FGSCs的增殖活性；采用2,7-二氯荧光素法与试剂盒检测各组FGSCs中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量，谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶2(SOD2)活性；采用线粒体膜电位检测JC-1染色法检测各组FGSCs中线粒体膜电位水平；采用细胞凋亡检测试剂盒检测各组FGSCs的凋亡率；采用蛋白质印迹法检测各组FGSCs中生殖干性相关蛋白小鼠Vasa同源体(Mvh)、八聚体结合转录因子4(Oct4)及Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin蛋白和凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)的表达水平。结果：成功分离了符合条件的FGSCs,且PUE能促进细胞的增殖活力。与Control组相比，BU组、BU+PUE组和BU+PUE+DKK-1组细胞中ROS、MDA和cleaved caspase-3的表达水平均明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05),细胞的增殖活力，线粒体膜电位，细胞中GPx、SOD2、Mvh、Oct4、β-catenin及Bcl-2的表达水平均明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。与BU组相比，BU+PUE组细胞中ROS、MDA和cleaved caspase-3的表达水平均明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05),细胞的增殖活力，线粒体膜电位，GPx、SOD2、Mvh、Oct4、β-catenin及Bcl-2的表达水平却明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05),BU+PUE+DKK-1组与BU组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论：PUE可通过Wnt/β-catenin途径减轻BU诱导的氧化应激损伤和细胞凋亡，并恢复FGSCs的增殖活性及干性。

• 单位
  新疆维吾尔自治区人民医院