断藤益母汤对人脐静脉内皮细胞模型的作用机制

作者：钱凯; 郑雪霞; 许舒迪; 詹静怡; 叶棠明; 廖发杰; 刘敏莹; 林昌松

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(19): 36-45.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211706

• 断藤益母汤
• 人脐静脉内皮细胞
• 类风湿关节炎
• 血管内皮生长因子(VEGF)信号通路
• 内皮细胞活化
• 血管新生

目的:探讨断藤益母汤(DTYM)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)模型细胞活化的作用,以及对相关活化蛋白与血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的作用。方法:VEGF和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导HUVEC,DTYM(200,400 mg·L-1)作用后,采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8),5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)法,transwell鬼笔环肽荧光染色法及基质胶法检测细胞增殖活力、迁移和管形成能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测黏附因子E选择素(E-selectin),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和脉管细胞黏附分子-1(VCAM-1)mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血管性血友病因子(VWF),血小板-内皮细胞黏附分子31(CD31),血管诱导生成因子61(CYR61),血管生成素-1(ANG-1),VEGF和VEGF受体2(VEGFR2)的表达,免疫荧光检测CD31的表达。结果:与正常组比较,模型组HUVEC的增殖活力、迁移和管形成能力明显升高(P<0.05,P<0.01);E-selectin,ICAM-1,VCAM-1 mRNA表达升高(P<0.01);VWF,CD31,ANG-1,CYR61,VEGF-α,磷酸化(p)-VEGFR2蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),CD31免疫荧光强度升高(P<0.01);与模型组比较,DTYM两剂量组HUVEC的增殖活力、迁移和管形成能力明显降低(P<0.05,P<0.01);E-selectin,ICAM-1,VCAM-1 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),VWF,CD31,ANG-1,CYR61,VEGF-α,p-VEGFR2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),CD31免疫荧光强度降低(P<0.01)。结论:DTYM抑制HUVEC的增殖、迁移、黏附和管形成,与其调控HUVEC中CD31,VWF,CYR61,ANG-1的表达及VEGF信号通路有关。

• 单位
  广州中医药大学; 广州中医药大学第一附属医院