微小RNA-1291对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制研究

作者：汤小龙; 陈旭峰; 郑扬; 杨胜兰

来源：实用临床医药杂志, 2023, 27(09): 39-52.

• 胃癌
• 微小RNA-1291
• BMP激活素膜结合抑制因子
• 转化生长因子-β
• SMAD同源物4

目的 探讨微小RNA-1291(miR-1291)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制。方法 通过公共数据库分析miR-1291在胃癌组织、正常胃组织中的表达。培养人胃癌细胞SGC-7901、人胃黏膜上皮细胞GES-1,比较miR-1291表达水平。将miR-1291 mimic、miR-NC、miR-1291 inhibitor、miR inhibitor质粒分别转染至SGC-7901细胞，设为miR-1291组、miR-NC组、miR-1291 inhibitor组、miR inhibitor组。将BMP激活素膜结合抑制因子(BAMBI) mimic质粒、Vector质粒、sh-BAMBI质粒、sh-NC质粒分别转染至SGC-7901细胞中，设为BAMBI组、Vector组、sh-BAMBI组、sh-NC组。采用CCK-8法检测细胞增殖能力，采用Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力，采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1291和BAMBI mRNA表达水平，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测BAMBI、转化生长因子-β(TGF-β)、SMAD同源物4(SMAD4)蛋白水平，通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-1291和BAMBI的靶向关系。结果 胃癌组织miR-1291表达水平为(0.85±0.11),低于正常胃组织的(2.02±0.23),差异有统计学意义(t=18.33,P<0.01)。SGC-7901细胞miR-1291表达水平低于GES-1细胞，BAMBI蛋白、BAMBI mRNA表达水平高于GES-1细胞，差异有统计学意义(P<0.01)。miR-1291组细胞72 h时光密度(OD)值、侵袭细胞数、迁移细胞数低于或少于miR-NC组，miR-1291 inhibitor组细胞72 h时OD值、侵袭细胞数、迁移细胞数高于或多于miR inhibitor组，差异有统计学意义(P<0.01)。BAMBI组细胞72 h时OD值、侵袭细胞数、迁移细胞数高于或多于Vector组，sh-BAMBI组细胞72 h时OD值、侵袭细胞数、迁移细胞数低于或少于sh-NC组，差异有统计学意义(P<0.01)。miR-1291组细胞BAMBI蛋白、BAMBI mRNA表达水平低于miR-NC组，miR-1291 inhibitor组细胞BAMBI蛋白、BAMBI mRNA表达水平高于miR inhibitor组，差异有统计学意义(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示，miR-1291与BAMBI存在靶向关系。BAMBI组TGF-β、SMAD4蛋白水平低于Vector组，sh-BAMBI组TGF-β、SMAD4蛋白水平高于sh-NC组，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-1291可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力，其机制可能与负性调控BAMBI表达进而抑制TGF-β通路有关。