雷帕霉素与低频电磁场联合应用对大鼠骨髓间充质干细胞成骨效应的影响

作者：易智谦; 宋明宇; 虞冀哲; 刘阳; 韦盛; 杨勇; 李峰; 吴华

来源：中华物理医学与康复杂志, 2013, 35(05): 342-347.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-1424.2013.05.002

• 雷帕霉素
• 成骨诱导剂
• 电磁场
• 联合成骨

目的观察雷帕霉素与低频电磁场联合运用对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨效应的影响。方法选取成年SD大鼠15只,采用体外分离法培养大鼠BMSCs,传代3次后接种至细胞培养板中,将其分为对照组、雷帕霉素组、电磁场刺激组和联合应用组。对照组应用达尔伯改良伊格尔培养基(DMEM)进行培养;雷帕霉素组在DMEM中加入浓度为5 nM的雷帕霉素;电磁场刺激组则在DMEM基础上给予频率为15 Hz、强度为1 mT的脉冲电磁场刺激;联合应用组在加入浓度为5 nM雷帕霉素的DMEM基础上给予频率为15 Hz、强度为1 mT,每天1 h的脉冲电磁场刺激。分别于干预后7 d、14 d和21 d,提取细胞的总RNA和总蛋白,采用茜素红染色后置于显微镜下观察,分析比较不同时间点各组的成骨效应。结果 7 d后,联合应用组的早期成骨效应优于雷帕霉素组,雷帕霉素组的早期成骨指标家禽相关转移因子-2(Runx2)基因表达量明显高于对照组(P<0.05),电磁场刺激组Runx2基因表达量与对照组差异无统计学意义(P>0.05);14 d及21 d后,雷帕霉素组及电磁场刺激组的中期成骨指标骨唾液酸蛋白(BSP)和晚期成骨指标骨桥蛋白(OPN)的基因表达量均显著高于对照组(P<0.05),联合应用组BSP和OPN基因表达量明显低于雷帕霉素组(P<0.05)。结论单独应用雷帕霉素和电磁场刺激具有良好的促成骨效应,二者联合应用时,促成骨效应减弱。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院