新型鹅呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者：董嘉文; 黄允真; 李林林; 张俊勤; 陈修邓; 张志宏; 李万荣; 邝瑞欢; 孙敏华

来源：中国动物传染病学报, 2022, 1-9.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220721.002

• 新型鹅呼肠孤病毒
• TaqMan
• 荧光定量RT-PCR

2020年以来，在我国养鹅地区出现了一种由新型鹅呼肠孤病毒（NGRV）引起的以肝脾点状白色灶性坏死为主要病变特征的鹅传染性疾病。为了快速有效地检测新型鹅呼肠孤病毒（NGRV），本试验针对禽呼肠孤病毒的λC基因设计引物和探针，建立了基于TaqMan探针荧光定量PCR方法，结果显示：该方法特异性强，对鹅细小病毒、坦布苏病毒、鹅圆环病毒、番鸭呼肠孤病毒、新型鸭呼肠孤病毒和鹅星状病毒等病原不存在交叉反应；该方法具有较高的敏感性，最低可检测限为56.6个拷贝/μL，比常规PCR方法敏感10倍；该方法的重复性良好，组内和组间变异系数小于2%。对37份疑似新型鹅呼肠孤的临床样品检测结果显示，荧光定量RT-PCR和RT-PCR检测出阳性样品均为13份，两者符合率为100%。测序结果表明，13份阳性样品均为新型鹅呼肠孤病毒。本试验成功建立了新型鹅呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法，为新型鹅呼肠孤病毒病的流行病学调查和防控奠定了坚实的基础。

• 单位
  广东省农业科学院动物卫生研究所; 江门市动物疫病预防控制中心