SFN通过NFE2L2信号通路缓解FFA诱导的肉牛单核巨噬细胞氧化损伤及凋亡

作者：王旋; 李卓; 孙旭东^*; 徐闯^*

来源：中国兽医学报, 2023, 43(12): 2561-2568.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.12.23

• FFA
• 肉牛单核巨噬细胞
• SFN
• 氧化应激
• 凋亡
• NFE2L2

旨在探讨游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)是否通过核转录因子E2相关因子2(nuclear factor E2-reated factor 2,NFE2L2)信号通路诱导肉牛单核巨噬细胞的氧化应激。采牛颈静脉血，体外分离培养肉牛单核巨噬细胞，用不同浓度的FFA(0、0.3、0.6和1.2 mmol/L)处理肉牛单核巨噬细胞24 h;用10μmol/L的萝卜硫素(sulforaphane, SFN)预处理细胞24 h后加入1.2 mmol/L FFA再处理24 h。使用各类试剂盒分别检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)和脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)的活性；通过q-PCR对Caspase-3、Caspase-9、NFE2L2及其下游血红素加氧酶1(heme oxyenase-1,HMOX1)和醌氧化还原酶(NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1)的基因表达水平进行定量分析；使用流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果显示，与对照组相比，不同浓度FFA处理细胞后，ROS和MDA的含量呈浓度依赖性升高(P<0.05),SOD和GSH-Px的活性逐渐下降(P<0.05);Caspase-3和Caspase-9基因相对表达量增加，细胞凋亡率显著增加；NFE2L2、HMOX1和NQO1的mRNA水平显著降低。与FFA+DMSO组相比，FFA+SFN组的NFE2L2 mRNA表达量显著升高(P<0.05),HMOX1、NQO1的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);ROS和MDA的含量显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。与FFA+DMSO组相比，FFA+SFN组细胞凋亡率显著降低。结果表明，SFN通过激活NFE2L2信号通路缓解FFA诱导的肉牛单核巨噬细胞氧化应激和凋亡。本研究为探明高FFA导致的肉牛单核巨噬细胞氧化损伤和凋亡的治疗靶点提供了理论依据。

• 单位
  动物科技学院; 黑龙江八一农垦大学