摘要
地衣芽胞杆菌DW2生长、杆菌肽合成代谢在能量及前体利用方面存在竞争关系,为了提高杆菌肽的合成效率,在20 L发酵罐水平研究了ccpN敲除对杆菌肽合成与细胞生长的调控效应。结果显示:菌株DW2ΔccpN杆菌肽峰值效价(1337 U/mL)比菌株DW2峰值效价(1024 U/mL)提高30.6%。但是,其峰值生物量(3.39×10~(10) CFU/mL)仅为菌株DW2峰值生物量(5.56×10~(10) CFU/mL)的61%。另外,DW2ΔccpN胞外氨基酸浓度(36 h)、溢流有机酸总量(22~27 h)分别比DW2提高43.8%和24.7%~37.6%。同时,细胞对数期能量代谢(citZ、icd、zwf、cydA)、氨基酸转运(relA、brnQ、vpr、yvbW)以及丙酮酸转化(pycA、pckA、pyk)和hprK等13个基因的转录组表达(TPM值)也上调2.0~18.4倍,说明:菌株DW2ΔccpN的溢流代谢增强,为对数后期提供了更多的碳源和能源分子;细胞严谨响应增强使CodY的调控活性下降,降低了细胞的生长速率、提高了氨基酸转运能力、增加了ATP和NADPH的供应,最终提高了杆菌肽的合成效率,为杆菌肽发酵生产提供了重要参考。
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单位湖北省工业微生物重点实验室; 湖北工业大学; 绿康生化股份有限公司