单核细胞微泡对人血管平滑肌细胞增殖的作用与机制

作者:邹雪; 蔡晋; 谭小容; 王甲良; 曾春雨
来源:中华高血压杂志, 2014, 22(05): 439-444.
DOI:10.16439/j.cnki.1673-7245.2014.05.010

摘要

目的研究单核细胞微泡对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用并探讨其可能的机制。方法按照如下方法培养VSMC:给予未经脂多糖刺激的,通过多步差速离心法提取的人单核细胞系THP-1细胞微泡(微泡组);给予经脂多糖100μg/L刺激的THP-1细胞来源的微泡[脂多糖刺激的微泡(LPS-Evs)组];给予可刺激VSMC增殖的去甲肾上腺素(NE)(NE组,作为阳性对照);给予与其他组等量的磷酸盐缓冲液(对照组)。二辛可酸法测定微泡蛋白浓度。应用[3 H]-胸腺嘧啶核苷掺入法和细胞计数试剂盒-8检测VSMC增殖。Western blotting检测蛋白的表达与活性。结果微泡组中,不同浓度的单核细胞微泡(1、5、15、25mg/L)均可促进VSMC增殖,与VSMC共培养24h后,微泡浓度15mg/L时VSMC增殖较1、5mg/L时增多(均P<0.05),而25mg/L时VSMC增殖幅度与15mg/L时差异无统计学意义(P>0.05)。微泡浓度在15mg/L时,微泡刺激24h较6、12hVSMC的增殖程度增强(均P<0.05),而刺激48与24h差异无统计学意义(P>0.05)。LPS-Evs组对VSMC增殖的促进作用较微泡组以及NE组更明显(P<0.01)。微泡刺激可诱导VSMC中细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶与p38的磷酸化,并上调c-fos与c-jun的表达,LPS-Evs的作用则更为明显。结论单核细胞微泡可诱导VSMC的增殖,这种作用可能与丝裂原活化蛋白激酶信号通路的激活有关。

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