新型重组人源抗狂犬病毒糖蛋白单链抗体的制备及活性分析

作者：蔡昆; 王慧; 史晶; 包士中; 侯晓军; 荫俊

来源：军事医学科学院院刊, 2007, (06): 505-508.

• 单链抗体
• 狂犬病毒
• 活性
• 原核表达 single-chain variable fragments
• rabies virus
• activity
• prokaryotic expression

目的:利用大肠杆菌表达新型人源抗狂犬病毒糖蛋白单链抗体ScFv,并验证其活性。方法:采用基因融合获得ScFv基因,构建重组表达质粒pET-22b(+)-ScFv,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得高效表达。结果:Western印迹显示目的蛋白表达正确,表达产物以包涵体形式存在,经Ni-NTA柱纯化和体外复性,获得纯度达90%的ScFv蛋白。ELISA结果显示在PBS及人血清中ScFv的结合稳定性有所提高,流式细胞术证明目的蛋白能靶向结合狂犬病毒,通过中和效价测定实验测得ScFv的中和效价为40 U/mg。结论:成功利用原核表达系统实现了对人源抗GPRV ScFv的表达,并且具有...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院