摘要
目的探讨新生儿脐血间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)体外分离、纯化、扩增,以及向成骨及脂肪细胞定向诱导分化的方法与条件。方法无菌条件下收集新生儿脐血60~120ml,枸橼酸钠抗凝,以Fi-coll-Hypaque淋巴细胞分离液密度梯度法、沉降红细胞后密度梯度法及CD34+免疫磁珠负选法分离单个核细胞(mononuclearcells,MNCs)。分离获得的MNCs采用L-DMEM培养基或MesencultTM培养基/10%胎牛血清进行MSCs培养传代,获得第3代集落生长细胞作流式细胞仪表面抗原测定,并向成骨及脂肪细胞定向诱导分化,成骨细胞钙沉积经茜素红染色鉴定,...
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单位成都市儿童医院; 生物治疗国家重点实验室; 四川大学华西医院; 四川大学华西第二医院