登革4型病毒基因组cHP发卡结构对病毒复制和翻译的调控作用

作者:于学东; 姜涛; 陈水平; 邓永强; 韩剑峰; 赵慧; 李晓峰; 刘然; 于曼; 秦成峰; 秦鄂德
来源:军事医学科学院院刊, 2008, 32(03): 201-206.
DOI:10.3969/j.issn.1674-9960.2008.03.001

摘要

目的:探讨登革4型病毒C基因中保守的cHP发卡结构对病毒复制和翻译的调控作用。方法:首先在获得含有海肾荧光素酶(Renilla luciferase,R.luc)报告基因的复制子(DEN-R.luc2A-RP)基础上,利用重叠PCR构建cHP发卡结构系列突变体(cHP1~cHP6)。将构建的突变体(包括相关的阳性和阴性对照复制子)分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞。通过间接免疫荧光(IFA)、RT-PCR、R.luc报告基因检测技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译进行检测。结果:cHP发卡结构系列突变体均可在BHK-21细胞中复制...

  • 单位
    军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室

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