XIAP反义寡核苷酸对喉癌Hep-2细胞化疗增敏作用的研究

作者：路秀英; 李晓明; 张立坤; 韩海平

来源：中国耳鼻咽喉颅底外科杂志, 2011, 17(03): 167-170+174.

• X染色体连锁的凋亡抑制蛋白
• 喉肿瘤,癌
• 反义寡核苷酸
• 化疗
• 细胞凋亡

目的通过X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)反义寡核苷酸(antisense oligonu-cleotides,ASODN)转染喉癌Hep-2细胞,探讨其对喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响。方法体外培养人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞,应用脂质体法进行XIAP ASODN基因转染,荧光显微镜下观察计算转染率,MTT法检测基因转染前后联合顺铂作用对Hep-2细胞增殖的抑制情况,RT-PCR法检测XIAP mRNA水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率及XIAP蛋白表达。结果不同浓度XIAP ASODN转染喉癌Hep-2细胞转染率均在9 0%以上,无明显差异。不同浓度的顺铂作用2 4 h后对细胞增殖有抑制作用,并随剂量的增加抑制率逐渐增大(P<0.05),细胞凋亡率随顺铂(DDP)剂量的增加而逐渐增大(P<0.05);MTT法检测发现不同浓度及不同作用时间的XIAP ASODN与3μg/ml DDP联合作用对细胞的生长抑制率显著高于单用XIAP ASODN组和单用DDP组,差异均有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示ASODN+DDP组细胞凋亡率与单纯DDP组相比显著升高(P<0.01);RT-PCR法显示ASODN+DDP组XIAP mRNA的表达明显下调,而对照组和错义寡核苷酸(scrabble oligonucleotides,SCODN)组XIAP mRNA水平无明显变化;流式细胞仪结果显示ASODN治疗组的XIAP蛋白荧光指数明显低于空白对照组、脂质体转染组以及SCODN转染组(P<0.05),Pearson相关分析显示,在不同处理组与对照组中细胞凋亡率的变化与XIAP蛋白荧光指数的变化呈负相关(r=-0.976,P<0.01)。结论 XIAPASODN喉癌转染Hep-2细胞能够抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,并能提高其对化疗的敏感性。

• 单位
  白求恩国际和平医院