黄色链霉菌TRM45540遗传转化系统的构建

作者：夏影影; 张巧燕; 邢利; 陈乙煌; 黄建军; 罗晓霞^*

来源：塔里木大学学报, 2021, 33(03): 33-38.

• 黄色链霉菌
• 接合转移
• 遗传转化

黄色链霉菌(Streptomyces luteus)TRM45540是分离自新疆罗布泊土壤的高产放线菌素D的链霉菌新物种,为了深入挖掘其基因功能和代谢活性,需要建立该菌株的遗传转化系统。本研究以整合型载体pSET152和自杀型载体pKC1139为出发质粒,ET12567(pUZ8002)为供体菌,TRM45540为受体菌,通过大肠杆菌-链霉菌属间接合转移方法建立TRM45540遗传转化系统。MS培养基为最适产孢培养基和接合子最适生长培养基,TRM45540菌株对安普霉素(APR)、硫链丝菌素(THIO)和卡那霉素(KAN)敏感;TSB培养基为大肠杆菌-黄色链霉菌属间接合转移最适培养基;最适萌发时间为4 h。结果表明:TRM45540菌株接合转移系统通过MS培养基培养收集孢子,将收集的孢子于TSB培养基中50℃热激10 min,37℃萌发4 h后,与供体菌ET12567 (pUZ8002)在MS培养基上进行接合转移,接合转移的抗性筛选标记可以采用APR抗性、THIO抗性和KAN抗性。本研究成功构建TRM45540菌株的遗传转化系统,为后期进行遗传转化研究奠定了基础。

• 单位
  塔里木大学; 生命科学学院