多杀性巴氏杆菌荧光RAA快速检测方法的建立

作者：杜秋明; 郑秀红; 樊晓旭; 赵永刚; 乔启波; 南文龙; 许龙春; 吴晓东^*

来源：中国动物传染病学报, 2023, 31(02): 120-125.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2023.02.004

• 多杀性巴氏杆菌
• 重组酶介导等温扩增
• 快速检测

为建立一种敏感特异、简便快速的多杀性巴氏杆菌检测方法，根据多杀性巴氏杆菌kmt1基因保守区序列设计特异性引物和探针，通过对反应条件优化筛选，建立了重组酶介导的等温扩增（RAA）荧光检测方法。结果显示，建立的多杀性巴氏杆菌RAA荧光检测方法在39℃恒温条件下20 min内即可特异性的检出多杀性巴氏杆菌，与鸭疫里默氏杆菌、副猪嗜血杆菌、支原体、链球菌、大肠杆菌、附红细胞体、新孢子虫无交叉反应，方法的最低检出限为10 copies/μL，组内和组间重复性试验的变异系数均小于10%，用该方法对45份临床样本进行检测，结果阳性率为33.33%，与荧光定量PCR方法检测结果一致。本研究建立的多杀性巴氏杆菌荧光RAA检测方法操作简单、反应时间短、具有较高的特异性和敏感性，不依赖于复杂的仪器，适合临床上对多杀性巴氏杆菌的快速检测。

• 单位
  中国动物卫生与流行病学中心