基于网络药理学和实验验证分析半枝莲-山慈菇治疗卵巢癌的分子机制

作者：张婕; 高晓晴; 吴宏进; 戴薇薇; 齐聪^*

来源：国际中医中药杂志, 2023, 45(12).

• 半枝莲
• 山慈菇
• 卵巢癌
• 网络药理学
• 分子机制
• 实验验证

目的基于网络药理学和体外细胞实验, 研究半枝莲-山慈菇治疗卵巢癌的主要活性成分和潜在作用机制。方法利用TCMSP、SwissTargetPrediction数据库检索半枝莲和山慈菇的活性成分和作用靶点, 并通过GeneCards、OMIM、DrugBank、DisGeNET数据库收集卵巢癌相关作用靶点。筛选半枝莲-山慈菇干预卵巢癌的交集靶点, 利用STRING数据库构建交集靶点PPI网络。利用DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析;采用Cytoscape 3.9.0软件构建"活性成分-靶点-通路"网络。对关键靶点和通路进行体外实验验证, 采用MTT法检测不同浓度槲皮素、谷甾醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制率。将人卵巢癌SKOV3细胞按随机数字表法分为对照组、槲皮素组和谷甾醇组, 相应药物干预48 h后, 采用克隆形成实验检测槲皮素、谷甾醇对SKOV3细胞克隆形成能力的影响, 采用PCR检测各组细胞Akt1、VEGFA、Caspase-3 mRNA水平, 采用Western blot法检测细胞PI3K、Akt、p-Akt、Caspase-3、VEGFA蛋白表达。结果得到半枝莲有效成分29个, 山慈菇有效成分3个, 其中共有成分2个;药物相关作用靶点291个;卵巢癌潜在靶点1 969个;半枝莲-山慈菇与卵巢癌的交集靶点137个。通过GO功能富集分析得到930个条目, 涉及生物过程722个、细胞组分76个、分子功能132个。KEGG通路富集涉及169条信号通路, 涉及肿瘤通路、PI3K-Akt信号通路、p53信号通路、IL-17信号通路等。体外实验结果显示, 槲皮素和谷甾醇组细胞增殖抑制率升高, 细胞克隆能力降低;槲皮素组、谷甾醇组Akt1、VEGFA mRNA水平降低(P<0.01或P<0.05), Caspase-3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.01), PI3K、p-Akt、VEGFA蛋白表达降低(P<0.01)。结论半枝莲-山慈菇通过多靶点、多通路协同作用抑制卵巢癌的发生发展, 可通过调控AKT1、VEGFA、Caspase-3等关键基因和PI3K-Akt通路的表达诱导SKOV3细胞凋亡。

• 单位
  上海中医药大学附属龙华医院; 中心实验室; 上海中医药大学附属曙光医院