牙龈卟啉单胞菌侵入口腔上皮细胞后基因表达变化的初步研究

作者：成伟; 王洁; 孔令雪; 齐霞; 吴亚菲; 赵蕾

来源：牙体牙髓牙周病学杂志, 2012, 22(11): 641-645.

DOI：10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2012.11.007

• 牙龈卟啉单胞菌
• 口腔上皮细胞
• 侵入
• 差异显示PCR

目的:采用差异显示反转录PCR技术,比较牙龈卟啉单胞菌侵入口腔上皮细胞后基因表达的变化,初步筛选与细菌侵入宿主细胞相关的毒力致病基因。方法:提取纯培养状态和侵入KB细胞后的牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277细菌总RNA;反转录PCR技术显示cDNA表达条带;筛选并回收差异表达条带,二次扩增cDNA,经测序和BLAST同源性比对,初步分析细菌侵入KB细胞后表达差异基因的功能。结果:共筛选获得3条牙龈卟啉单胞菌侵入KB细胞后表达存在差异的基因HX 01、HX 02、HX 03;BLAST同源性比对结果显示,HX 01与牙龈卟啉单胞菌ABC转运蛋白编码基因PG 0683具有96%的同源性;HX 02与牙龈卟啉单胞菌PepO编码基因PG 0159具有97%的同源性;HX 03未找到类似同源性基因序列。结论:牙龈卟啉单胞菌在侵入KB细胞后发生了细菌毒力基因的表达变化,跨膜蛋白ABC转座子和PepO可能参与细菌侵入宿主细胞的致病过程。

• 单位
  四川大学; 四川大学华西口腔医院; 口腔疾病研究国家重点实验室