猪圆环病毒2型Rep和Rep’蛋白免疫原性及其抗体中和活性的测定

作者：刘丹; 王一平; 危艳武; 唐青海; 吴洪丽; 刘建波; 李胜斌; 魏萍; 刘长明

来源：中国兽医科学, 2012, (12): 1216-1223.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2012.12.001

• 猪圆环病毒2型
• Rep和Rep’蛋白
• 杆状病毒表达
• 免疫原性
• 中和活性 porcine circovirus type 2
• Rep and Rep' proteins
• baculovirus expression
• immunogenicity
• neutralizing activity

为了构建表达PCV2Rep和Rep’蛋白的重组杆状病毒,采用高保真PCR法从病毒感染细胞中扩增Rep和Rep’蛋白基因,并克隆到杆状病毒转移载体(pBlueBac4.5/V5-His-TOPO)。将重组质粒与线性化杆状病毒DNA共转染昆虫细胞(Sf21),经同源重组和蚀斑筛选,获得2株高效表达PCV2Rep和Rep’蛋白的重组杆状病毒。经3次克隆的重组毒株的毒价达3.0×107 PFU/mL和7.0×107 PFU/mL。蛋白表达产物分析表明,PCV2Rep和Rep’蛋白分子质量为36.0ku和20.4ku,分别占总蛋白含量的6.2%和10.1%。免疫活性分析表明,这2种重组蛋白均可与PCV2...

• 单位
  东北农业大学; 中国农业科学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室