摘要
目的探讨人T细胞免疫球蛋白与黏蛋白1(Tim-1)在胶质母细胞瘤中的表达及对肿瘤细胞生物学功能的影响。方法通过组织芯片免疫组织化学、蛋白质印迹法(Western blot)检测Tim-1在胶质母细胞瘤组织(西安百思达生物科技有限公司, GL805a、GL805c)及细胞株(购自中国科学院上海细胞研究所)中的表达;通过RNA干扰(RNAi)技术构建下调Tim-1表达的胶质母细胞瘤细胞株, 采用t检验比较Tim-1敲低组和Tim-1对照组细胞在增殖、侵袭、迁移上的差异。结果 Tim-1在胶质母细胞瘤组织中的表达(142.769±37.552)高于正常脑组织(43.501±23.811);在胶质母细胞瘤细胞株(U87、U251)中的表达高于人脑正常胶质细胞株(HEB)(HEB:0.339±0.021, U87:0.919±0.066, t=21.910, P<0.01;U251:1.074±0.085, t=12.559, P<0.01);成功构建下调Tim-1的胶质母细胞瘤细胞株(sh-Tim-1-U87、sh-Tim-1-U251);细胞计数试剂盒(CCK-8)结果显示下调Tim-1后肿瘤细胞活力显著降低(24 h sh-NC:0.379±0.059, sh-U87:0.223±0.046, t=2.767, P<0.05;sh-U251:0.210±0.036, t=5.637, P<0.01。48 h sh-NC:0.677±0.034, sh-U87:0.444±0.052, t=4.968, P<0.01;sh-U251:0.441±0.056, t=8.831, P<0.01。72 h sh-NC:0.801±0.052, sh-U87:0.579±0.060, t=4.487, P<0.01;sh-U251:0.636±0.056, t=8.991, P<0.01);划痕实验结果表明下调Tim-1后肿瘤细胞迁移能力显著降低(sh-NC:74.667±4.510, sh-U87:44.333±4.509, t=11.651, P<0.01;sh-U251:34.003±3.606, t=18.401, P<0.01);Transwell实验显示下调Tim-1后肿瘤细胞侵袭能力显著降低(sh-NC:202.000±10.149, sh-U87:108.333±7.506, t=11.294, P<0.01;sh-U251:137.667±11.061, t=12.763, P<0.01)。结论 Tim-1在胶母细胞瘤组织和细胞株中高表达, 下调Tim-1可有效抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
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单位苏州大学附属第三医院