UHRF1基因沉默可促进人肺腺癌A549细胞的凋亡

作者：杨从容; 赵学涛; 王军; 吴凤鹏; **; 程云杰; 景绍武; 边晨峰

来源：肿瘤, 2015, 35(11): 1222-1229.

• 肺肿瘤
• 慢病毒感染
• RNA干扰
• 细胞凋亡
• UHRF1基因

目的 :探讨慢病毒介导的sh RNA干扰泛素样含PHD和环指域1[ubiquitinlike with plant homeodomain(PHD)and ringfinger domain 1,UHRF1]基因表达对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 :应用蛋白质印迹法从4条针对UHRF1基因的RNA干扰慢病毒载体中筛选出1条敲减效率最高的p GC-UHRF1-sh RNA-LV-GFP#1包装成慢病毒。实验设未进行感染的空白对照组、感染非特异性sh RNA的阴性对照组和感染p GC-UHRF1-sh RNA-LV-GFP#1的UHRF1 sh RNA组。慢病毒感染A549细胞后,应用RT-PCR法检测各组细胞中UHRF1 m RNA的表达水平,蛋白质印迹法检测各组细胞中UHRF1、Bax、caspase 9和Bcl-2蛋白的表达水平;FCM法检测各组细胞的凋亡情况。结果:慢病毒p GC-UHRF1-sh RNA-LV-GFP#1感染A549细胞后明显下调UHRF1 m RNA和蛋白表达水平(P值均<0.01)。UHRF1 sh RNA组A549细胞的凋亡率显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著下调(P<0.01),而促凋亡蛋白Bax和caspase 9的表达水平显著上调(P值均<0.01)。结论 :慢病毒介导的sh RNA沉默UHRF1基因表达可促进人肺腺癌A549细胞的凋亡,其作用可能与上调Bax、caspase 9蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达有关。

• 单位
  定州市人民医院; 河北医科大学第四医院