摘要

目的探究沙棘总黄酮(TFH)对人增生性瘢痕成纤维细胞(Fbs)增殖、迁移和凋亡的影响。方法增生性瘢痕(HS)组织取自2019年9月至2020年3月新疆医科大学第一附属医院整形外科10例HS患者, 组织块法培养Fbs, 通过细胞计数实验(CCK-8)检测不同浓度TFH对Fbs增殖活力的影响, 细胞划痕实验检测TFH对Fbs迁移能力的影响, 流式细胞术检测TFH对Fbs细胞周期、凋亡的影响, 分析细胞周期比例和凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)检测TFH对Fbs中Ⅰ型胶原(Col1)、Ⅲ型胶原(Col3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达影响。组间比较采用单因素方差分析。结果 50、100、200、400、800 μg/ml TFH呈浓度依赖性抑制Fbs细胞增殖[(16.35±2.41)%比(20.86±2.58)%比(40.89±0.33)%比(76.23±0.14)%比(85.04±0.58)%, F=75.63, P<0.05]。干预24 h半数抑制浓度(IC50)=224.2 μg/ml, 分为对照组、150 μg/ml TFH组、300 μg/ml TFH组。随TFH浓度增大, 伤口愈合面积减小(5.74±0.54比2.55±0.32比2.07±0.41, F=18.43, P<0.01), G0/G1期细胞比例减少[(86.24±1.71)%比(79.42±0.48)%比(74.64±1.92)%, F=44.72, P<0.01], S期和G2/M期比例增多[(9.27±1.28)%比(12.57±0.47)%比(17.36±1.90)%, F=44.72, P<0.05, (4.49±0.44)%比8%比8%, F=190.6, P<0.01], Fbs凋亡率升高[(0.40±0.26)%比(19.43±0.91)%比(31.17±1.46)%, F=719.3, P<0.01], Fbs中Col1、Col3、α-SMA、bcl-2、Caspase-3蛋白表达减少(1.07±0.01比0.73±0.01比0.58±0.01, F=10 840, P<0.01;1.14±0.03比0.87±0.01比0.70±0.01, F=446.50, P<0.01;1.14±0.02比0.87±0.01比0.69±0.01, F=1 314, P<0.01;1.13±0.02比0.68±0.01比0.56±0.01, F=2 756, P<0.01;0.92±0.01比0.89±0.01比0.61±0.01, F=1 039, P<0.01], bax蛋白表达水平升高(0.91±0.01比1.07±0.01比1.03±0.01, F=192.90, P<0.05), 作用呈浓度依赖性。结论 TFH可抑制人增生性瘢痕Fbs增殖、迁移能力, 诱导细胞凋亡, 调节胶原代谢。

  • 单位
    新疆医科大学第一附属医院