干扰FABP1基因对猪肌内脂肪沉积的影响

作者：熊讯; 李永; 阮涌; 许厚强^*

来源：南方农业学报, 2023, 54(08): 2454-2464.

• 猪
• FABP1基因
• 脂肪酸
• 甘油三酯
• 脂肪沉积

【目的】明确FABP1基因对猪肌内脂肪细胞脂肪酸和脂肪合成的影响，为进一步解析FABP1基因对猪肌内脂肪沉积和脂质代谢的调控作用提供依据。【方法】设计香苏杂交猪FABP1基因干扰载体的靶序列并合成，通过载体连接构建shRNA-FABP1干扰载体并测序验证；将正确的干扰靶序列转染猪肌内脂肪细胞，通过转染效果和实时荧光定量PCR筛选干扰效率最高的靶序列进行后续试验。采用TRIzol?Reagent总RNA提取试剂盒提取转染shRNA-FABP1干扰载体后的猪肌内脂肪细胞的总RNA，以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR检测脂肪沉积相关基因的相对表达量。运用气相色谱—质谱联用仪靶向检测猪肌内脂肪细胞内中长链脂肪酸(LCFA)的含量；采用GPO-PAP酶法检测猪肌内脂肪细胞甘油三酯(Triglyceride,TG)和胆固醇的含量。【结果】成功构建了shRNA-FABP1干扰载体并筛选出最佳干扰效率片段。FABP1基因干扰显著(P<0.05，下同)或极显著(P<0.01，下同)降低了脂肪沉积相关基因的相对表达量，包括LPL、FABP3、IGFBP4和OLR1。在FABP1基因干扰后的猪肌内脂肪细胞中共检测出38种脂肪酸，29种脂肪酸有差异；其中，FABP1基因干扰上调包括棕榈酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)和油酸(C18:1N9)等17种脂肪酸的比例，下调包括二十碳五烯(C20:5N3)、十七碳烯酸(C17:1N7)和十三烷酸(C13:0)等12种脂肪酸的比例。FABP1基因干扰显著或极显著降低了香苏杂交猪肌内脂肪细胞内TG和胆固醇的含量。【结论】干扰FABP1基因通过抑制与脂肪酸转运和TG合成相关基因的表达，从而改变脂肪酸的组成比例，降低TG和胆固醇的含量。

• 单位
  贵州大学; 生命科学学院; 动物科学学院