人转录因子USF基因在大肠杆菌中的表达、纯化及在FAK启动子中的结合研究

作者：李淑锋; 华子春

来源：东南大学学报(医学版), 2007, 26(04): 267-270.

DOI：10.3969/j.issn.1671-6264.2007.04.007

• USF基因
• 粘着斑激酶
• 蛋白表达
• 转录因子 upstream stimulatory factor
• focal adhesion kinase
• protein expression
• transcription factor

目的:在大肠杆菌中表达人源转录因子USF(upstream stimulatory factor)并进行分离纯化,进一步分析其在FAK(focaladhesion kinase)启动子中的DNA结合能力。方法:将人源USF cDNA克隆到表达质粒pET28a载体,然后将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达带His6-Tag的融合蛋白His-USF,通过镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE分析鉴定。EM-SA分析纯化后的蛋白与FAK启动子的DNA结合情况。结果:His-USF在大肠杆菌中获得高效表达,镍柱亲和层析纯化得到了高纯度的蛋白,并能够结合到FAK的启动子上。结论:...

• 单位
  医药生物技术国家重点实验室; 东南大学; 基础医学院; 南京大学