科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的：以脾阴虚证模型大鼠为研究对象，探析脾阴虚对胃肠吸收、水液代谢及肠道菌群的影响。方法：采用荤素饮食不节、负重疲劳游泳和温热伤阴药灌胃复合因素建立脾阴虚证大鼠模型，观察空白组和模型组大鼠的体质量、进食量、饮水量、游泳持续时间的变化；苏木素-伊红（HE）染色观察胃和结肠组织病理损伤情况；间苯三酚法检测尿D-木糖排泄率；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中胃泌素（GAS）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胃组织中血管活性肠肽（VIP）、水通道蛋白3(AQP3)、AQP4的相对表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测胃组织中VIP、AQP3、AQP4的mRNA相对表达水平；16S rDNA测序分析其肠道菌群的变化。结果：与空白组比较，一般体征结果显示，模型组大鼠体质量和进食量均明显降低，饮水量明显增多（P<0.05,P<0.01），游泳持续时间显著减少（P<0.01）；病理检测结果显示，模型组大鼠胃组织黏膜出现排列不齐，结肠组织黏膜可见明显变薄或有残缺，上皮细胞出现坏死甚至脱落现象；与空白组比较，模型组大鼠尿D-木糖排泄率显著降低（P<0.01），血清GAS含量明显降低（P<0.05）;Western blot结果显示，与空白组比较，模型组大鼠胃组织中VIP蛋白的相对表达水平显著降低（P<0.01）,AQP4、AQP3蛋白的相对表达水平显著增加（P<0.01）;Real-time PCR结果显示，与空白组比较，模型组大鼠胃组织中VIP mRNA的相对表达水平显著降低（P<0.01）,AQP3和AQP4 mRNA的相对表达水平明显增加（P<0.05,P<0.01）；肠道菌群分析结果显示，与空白组比较，模型组操作分类单元（OTU）数目和α多样性增加，β多样性明显降低，紫单胞菌科丰度明显增加，产丁酸菌种丰度明显降低（P<0.05）；斯皮尔曼计算法（Spearman）相关分析显示，紫单胞菌科与AQP4蛋白水平呈明显正相关（P<0.05），产丁酸菌种与VIP蛋白水平呈明显正相关（P<0.05），与AQP3、AQP4蛋白水平呈明显负相关（P<0.05）；线性判别分析（LDA）效应量（LEfSe）结果显示，组间多种肠道菌存在明显差异，模型组大鼠肠道中迷踪菌门/目/科/属、β-变形菌纲、伯克氏菌目、萨特菌科、副萨特氏菌属被明显富集（P<0.05）。结论：脾阴虚证可以减弱胃肠道的消化和吸收能力，引起水液代谢和肠道菌群的紊乱，胃黏膜VIP、AQP3、AQP4蛋白水平与紫单胞菌科、产丁酸菌种密切相关，VIP、AQP3、AQP4可能参与调节肠道菌群以影响脾主运化的生理功能。
-
单位江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心; 江西省中医病因生物学重点实验室
