基于桥接DNA的实时荧光定量PCR高灵敏检测沙丁胺醇

作者：赵领娣; 孙铁强; 刘文涛; 贺鸿伟; 董博伟; 张迎春; 秦天悦; 宁保安; 李双; 彭媛; 韩殿鹏; 崔建升^*; 高志贤^*

来源：食品研究与开发, 2020, 41(14): 158-163.

• 沙丁胺醇
• 桥接DNA
• 实时荧光定量聚合酶链式反应技术
• 免疫磁珠
• 邻位连接技术

建立一种基于免疫磁珠、桥接DNA与实时荧光定量聚合酶链式反应技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)相结合的高灵敏、特异性检测沙丁胺醇(salbutamol,SAL)的方法,通过抗体特异性识别两个邻位连接探针,在桥接DNA的桥接作用下将两个邻位探针连接形成全长扩增子,以此为模板进行qPCR实现信号放大。结果表明,方法检测SAL的线性范围为1.0×10-2ng/mL～1.0×103 ng/mL,检出限为1.2×10-2ng/mL,测定自来水及人工尿液样品中SAL的加标回收率在87.1%～111.7%之间。通过免疫磁珠提高检测的效率,通过桥联DNA提高特异性,通过变温扩增提高检测方法的灵敏度以及适用性,搭建高特异性、通用的检测平台,实现对沙丁胺醇的高灵敏检测。

• 单位
  环境科学与工程学院; 河北科技大学