CYP3A5通过影响cyclin D1蛋白表达水平促进胰腺癌细胞增殖

作者：朱建伟; 孔祥毓; 孔凡扬; 朱惠云; 安薇; 吴洪玉; 李兆申; 金震东

来源：中华胰腺病杂志, 2018, 18(03): 175-179.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2018.03.008

• 胰腺肿瘤
• 细胞色素类
• 细胞增殖
• CYP3A5
• cyclin D1

目的探讨CYP3A5对胰腺癌细胞增殖的影响及其可能机制。方法采用蛋白质印迹法检测BxPC-3、FG、MDA28、8902、PANC15株胰腺癌细胞株CYP3A5蛋白表达,选取蛋白表达量最低的PANC1细胞和表达量最高的BxPC-3细胞分别进行CYP3A5过表达质粒转染和靶向CYP3A5的siRNA(siRNA-CYP3A5)转染,分别以空载质粒转染和非特异性siRNA(siRNA-NC)转染作为对照。采用CCK-8法和克隆形成实验检测CYP3A5过表达及表达抑制后对胰腺癌细胞增殖能力的影响。采用蛋白质印迹法及定量PCR法检测各组细胞周期调控基因cyclin E、cyclin D1及凋亡相关基因Bcl-2的蛋白和mRNA表达量。结果 CYP3A5过表达质粒转染PANC1后细胞CYP3A5蛋白表达显著增加(1.66±0.14比1.00,P=0.0021)。siRNA-CYP3A5转染BxPC-3细胞后CYP3A5蛋白表达显著下降(0.18±0.02比1.00,P<0.0001)。CYP3A5过表达组与空载质粒组PANC1细胞培养48、72 h的A450值分别为1.36±0.05比1.15±0.03、2.10±0.09比1.42±0.03,过表达组显著高于空载质粒组,差异均有统计学意义(P值<0.005或0.001);siRNA-CYP3A5转染组与siRNA-NC转染组BxPC-3细胞培养48、72 h的A450值分别为0.62±0.01比0.77±0.03、0.83±0.01比1.18±0.02,siRNA-CYP3A5转染组显著低于siRNA-NC转染组,差异均有统计学意义(P值<0.05或<0.001)。过表达组PANC1细胞克隆形成率为(19.33±0.58)%,显著高于空载质粒组的(9.67±0.63)%;siRNA-CYP3A5组克隆形成率为(8.50±0.80)%,显著低于siRNA-NC组的(16.00±0.60)%,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。过表达组PANC1细胞cyclin D1蛋白表达量为2.00±0.11,显著高于空载质粒组的1.00;siRNA-CYP3A5组BxPC-3细胞cyclin D1蛋白表达量为0.45±0.04,显著低于siRNA-NC组的1.00,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。但CYP3A5过表达或抑制对cyclin D1 mRNA表达量以及cyclin E、Bcl-2蛋白和mRNA的表达均无影响。结论 CYP3A5通过上调cyclin D1蛋白表达促进胰腺癌细胞增殖。

• 单位
  长海医院消化内科; 中国人民解放军第二军医大学