番茄外泌体的分离提取工艺优化及其作为药物载体的可行性分析

作者:吴菊萍; 肖倩; 王建国; 王莺*
来源:中国现代医学杂志, 2019, 29(24): 8-14.
DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2019.24.002

摘要

目的优化番茄外泌体提取工艺,初步探索番茄外泌体作为纳米载体的可行性。方法利用蔗糖密度梯度法提取番茄外泌体;动态光散射仪和透射电镜鉴定外泌体纳米粒子特征;用MTT法检测外泌体对A549、A2780及HONE1(EBV+)3种肿瘤细胞的毒性。构建外泌体携带模型药物Di I和目的基因反义EBV-miR-BART7-3p的纳米药物,考察其细胞摄取能力,实时荧光定量聚合酶链反应检测基因药物的沉默效果。结果优化工艺可获得具有纳米粒径的高收率外泌体(1.31 g/kg),呈球形脂质双分子层结构,并对细胞无毒性。外泌体构建的纳米药物可被细胞摄取并分布于胞浆。外泌体负载基因可有效降低目的基因的表达水平(P<0.05)。结论多步差速离心法和蔗糖密度梯度法可优化番茄外泌体的提取工艺,番茄外泌体可作为优良药物载体。

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