miR-139555及其靶基因PtNBC在三疣梭子蟹适应盐度胁迫中的表达调控

作者：赵笑颜; 吕建建; 张文; 吴捷; 金玲; 刘萍^*

来源：水生生物学报, 2022, 46(03): 316-323.

• 低盐胁迫
• 碳酸氢钠协同转运
• miRNA
• 三疣梭子蟹

为研究miR-139555及其潜在靶基因PtNBC(碳酸氢钠协同转运基因)在三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)适应盐度胁迫中的表达调控分析,利用RACE技术克隆了PtNBC基因,该基因全长5308 bp,开放阅读框(ORF)3570 bp,共编码1189个氨基酸。利用RT-PCR技术分析miR-139555和PtNBC基因在三疣梭子蟹不同组织及低盐胁迫(11)下的表达规律。组织表达分布结果显示, miR-139555和PtNBC基因均在三疣梭子蟹鳃组织中表达量最高,与其他组织相比,有显著差异(P<0.05)。体外双荧光素酶实验表明, miR-139555能够显著抑制PtNBC基因的表达(P<0.001)。低盐胁迫显著影响了miR-139555和PtNBC基因的表达,且两者间的表达趋势呈现明显的负相关。在低盐胁迫后, miR-139555整体呈现上调表达的趋势且在48h达到最大值,为对照组的4.9倍(P<0.05),而PtNBC基因呈现显著下调表达的趋势且各时间点表达量均低于对照组,在12h表达量最低,为对照组的0.06倍(P<0.05)。研究结果证明了PtNBC基因是miR-139555的靶基因, miR-139555可能通过调控鳃上皮细胞PtNBC基因的表达发挥重要的渗透压调节功能。

• 单位
  上海海洋大学; 中国水产科学研究院黄海水产研究所