慢病毒介导siRNA干扰MyD88表达对大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响

作者：唐光亮; 范慧敏; 刘中民

来源：同济大学学报(医学版), 2010, (03): 9-14.

• MyD88
• 大鼠肺泡巨噬细胞
• RNAi
• 慢病毒
• IL-1β
• IL-6 MyD88
• rat alveolar macrophage
• RNAi
• lentivirus
• IL-1β
• IL-6

目的采用RNA干扰技术,通过构建表达大鼠髓样分化因子88(MyD88) siRNA的慢病毒干扰大鼠肺泡巨噬细胞MyD88的表达,检测其对细胞功能的影响。方法针对MyD88基因,设计并构建3对siRNA表达质粒,分别与预先构建好表达MyD88的质粒共转染HEK-293T细胞,Western blot检测MyD88的表达情况,筛选出其中1对干扰效率最高的siRNA,用Gateway的方法构建慢病毒干扰载体包装成慢病毒,将慢病毒转染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383细胞并加入内毒素(LPS)诱导,未转染慢病毒的细胞作为空白对照组和LPS激活组:空白对照组加入与LPS等体积的PBS;LPS激活组加入LPS...

• 单位
  同济大学附属东方医院