病毒诱导的基因沉默防控烟草马铃薯Y病毒病研究

作者:刘天波; 蔡海林; 滕凯; 曾维爱; 毛辉; 魏润洁; 周志成; 周向平; 戴良英; 唐前君*
来源:中国烟草学报, 2020, 26(05): 82-89.
DOI:10.16472/j.chinatobacco.2019.287

摘要

【背景】病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是植物抗病毒侵染的一种自然机制。【方法】以马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)脉坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein, CP)基因为靶向序列,构建烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默表达载体pTRV2-CP,转化农杆菌GV3101后,与pTRV1-GV3101混合成TRV::CP(OD600 0.4~0.6)喷施处理剪叶后的烟苗,测定其侵染效率。人工接种PVY于对照及TRV::CP处理的烟苗,RT-qPCR检测、表型观察和小区试验评价TRV介导的VIGS体系对PVY侵染的沉默效果。【结果】①与TRV::00相比,接种PVY 35 d时,TRV::CP处理的烟株中PVY累积量减少了72.8%;②VIGS表达载体45 d内能有效表达;③温室盆栽和田间小区试验TRV::CP处理对PVY防治效果分别达到85.12%和73.08%。【结论】研究建立的VIGS体系能够沉默PVY CP基因的表达,有效防治烟草马铃薯Y病毒病,为PVY的防治提供了新的方法。

全文