摘要

为探究松材线虫抗逆态幼虫DL3形成的分子机理,对其鸟苷酸环化酶路径中的抗逆态基因BxDaf-22进行了鉴定和表达研究。笔者应用BLAST比对技术在松材线虫基因组数据中鉴定得到固醇载体蛋白SCP2同源基因,命名为Bx-Daf-22。根据松材线虫基因组数据设计引物,应用PCR技术扩增BxDaf-22完整蛋白编码区。进一步对Bx-Daf-22基因编码的氨基酸序列进行同源序列系统进化、系统发育分析、保守结构域分析和蛋白质三维结构比对等生物信息学分析。应用荧光定量Q-PCR对不同虫龄Bx-Daf-22表达丰度进行分析。结果表明:Bx-Daf-22由4个α螺旋,1个310螺旋位于碳(C)端,在1号和2号α螺旋中间包围着5个β折叠。Bx-Daf-22具有固醇载体蛋白SCP2构域,可将起始信号传递到c GMP路径的膜结合受体上,表明该蛋白可以完成cGMP路径中受体蛋白的功能。以二龄幼虫作为标准,抗逆态幼虫DL3的Bx-Daf-22表达量显著上调,雄成虫Bx-Daf-22表达量下调显著。Bx-Daf-22蛋白质结构及不同虫龄Bx-Daf-22表达量表明,该基因参与与cGMP路径且与DL3形成直接相关。