狂犬病毒CVS株G基因和IFN-a基因共表达重组腺病毒载体的构建

作者：李江涛; 殷相平; 柳纪省; 胡永浩

来源：甘肃农业大学学报, 2008, (06): 1-5.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2008.06.029

• 狂犬病病毒G基因
• IFN-a基因
• 内部核糖体进入位点序列
• 重组腺病毒 G gene of RV
• IFN-a gene
• IRES
• recombinant adenovirus

通过RT-PCR方法扩增得到狂犬病毒G基因,PCR方法得到IFN-Αa基因并亚克隆入pIRES获得pIRES-a质粒.双酶切G基因和pIRES-a质粒并回收目的基因与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染人胚肾293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒.结果表明:该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达,说明成功构建了G和IFN-a双基因共表达重组腺病毒载体.

• 单位
  湖州市农业科学研究院; 甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部