卡介菌基因组DNA制备工艺研究

作者:王静; 胡振林; 周凤娟; 凌亦凌; 孙树汉
来源:中国生物制品学杂志, 2005, (01): 36-38.
DOI:10.13200/j.cjb.2005.01.40.wangj.013

摘要

目的 摸索制备高纯度卡介菌 (MycobacteriumbovisBacillusCalmette Gu啨rin ,BCG)基因组DNA(BCG -DNA)的制备工艺。方法 采用超声破碎结核杆菌 ,加热使蛋白变性初步去除菌体蛋白 ,进一步经蛋白酶消化 ,乙醇沉淀DNA组分 ,再经离子交换和凝胶过滤层析 ,去除残余菌体蛋白和多糖 ,精制DNA ,并进行质量检测。结果 所制备的BCG -DNA片段大小介于 2 0 0~ 2 5 0bp之间 ,纯度大于 95 % ,蛋白含量占 0 . 1% ,多糖残留占 3 .5 %。结论此方法制备的BCG- DNA纯度较高 ,且无有机溶剂残留 ,适用于BCG DNA制备。

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