网络药理学辅助探究牛膝及其不同炮制品对肾病综合征大鼠的保护作用

作者：刘萌; 王胜超; 曾梦楠; 张宇涵; 阚玉璇; 张贝贝; 郑晓珂; 冯卫生

来源：中药新药与临床药理, 2022, 33(04): 492-502.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2022.04.011

• 牛膝
• 盐牛膝
• 酒牛膝
• 炮制品
• 肾病综合征
• 大鼠
• 网络药理学

目的 探究牛膝、盐牛膝及酒牛膝对肾病综合征模型大鼠的影响及潜在机制。方法 60只雄性SD大鼠，除正常组（6只）外，其余大鼠尾静脉注射阿霉素（4 mg·kg-1），并于7 d后再次尾静脉注射阿霉素（3.5 mg·kg-1），正常组2次均尾静脉注射等剂量生理盐水。第2次尾静脉注射阿霉素7 d后检测反映模型是否复制成功的相关指标，即血清中肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平。将模型复制成功的30只大鼠随机分成5组：模型组、阳性药醋酸泼尼松组（12.5 mg·kg-1）、牛膝组（4 g·kg-1）、盐牛膝组（4 g·kg-1）和酒牛膝组（4 g·kg-1），每组6只，按照上述剂量每天灌胃给药1次，模型组给予等量水，持续2周。HE染色观察大鼠肾脏病理变化；比色法检测血清中Cr、BUN及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物歧化酶（GSH-Px）水平；ELISA法检测血清及肾组织中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素（IFN-γ）水平。网络药理学预测牛膝治疗肾病综合征的潜在机制并进行实验验证。Western Blotting法检测肾组织中NF-κB p-p65、NF-κB p65、p-smad3、smad3蛋白表达水平。结果 实验结果显示，模型组血清中Cr、BUN水平与正常组比较明显降低（P<0.01,P<0.05），模型复制成功。牛膝及其炮制品均能不同程度地改善肾组织病理损伤，降低血清中Cr、BUN、MDA水平，升高GSH-Px、SOD水平（P<0.05,P<0.01,P<0.001）；降低血清和肾组织中IL-6、IL-18、TNF-α、IFN-γ水平，升高IL-2水平（P<0.05,P<0.01,P<0.001）。网络药理学发现牛膝治疗肾病综合征可能主要通过TNF、转录因子AP(JUN)、IL-6等9个靶基因以及NF-κB、造血细胞调控、TGF-β信号通路等多条通路发挥作用。验证实验表明，与模型组比较，牛膝及其炮制品均能降低肾组织中NF-κB p-p65/NF-κB p65、p-smad3/smad3蛋白比值（P<0.05,P<0.01,P<0.001）。结论 牛膝及其2种炮制品对阿霉素肾病综合征模型大鼠均有不同程度的保护作用，且盐牛膝和酒牛膝作用优于牛膝，可能通过TNF及IL-6等靶点、NF-κB及TGF-β等信号通路对肾病综合征发挥作用。

• 单位
  河南中医药大学