三种软骨细胞分离培养方法对细胞骨架的影响比较

作者：李兵; 吴志宏; 刘广源; 肖军; 韩东; 邱贵兴

来源：中华实验外科杂志, 2007, 24(9): 1108-1110.

DOI：10.3760/j.issn:1001-9030.2007.09.029

• 软骨细胞
• 细胞骨架
• 原子力显微镜

目的 比较分离培养人类软骨细胞的3种方法,探讨各种方法的特点及对细胞骨架的影响.方法 分别采用酶消化法、组织贴块法、酶消化结合组织贴块法分离软骨细胞,测量每种方法分离的软骨细胞瓶底汇合形成单层时间,进行比较,以甲苯氨蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学评价细胞的生物特性,并用磁驱动原子力显微镜(MAC mode AFM)对二代细胞表面形态及细胞骨架特性进行检测.结果 MAC mode AFM检测显示,酶消化结合组织贴块法分离软骨细胞表面形态、细胞骨架分布更接近生理状态,甲苯氨蓝、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示强阳性,进行方差分析及q检验,3种方法分离的软骨细胞瓶底汇合形成单层时间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 酶消化结合组织贴块法细胞分离效率高、生长速度快、细胞骨架特性保持更好、细胞纯度高,在细胞骨架研究中可优先选用.

• 单位
  中国协和医科大学; 北京协和医院; 中国医学科学院; 国家纳米科学中心