淫羊藿苷对白介素-1β诱导软骨细胞退变的保护作用

作者：刘益杰; 陈世宣; 赵仙丽; 宁长青; 冯伟

来源：同济大学学报(医学版), 2018, 39(02): 56-60.

DOI：10.16118/j.1008-0392.2018.02.011

• 淫羊藿苷
• 软骨细胞
• 软骨退变
• 骨关节炎
• 大鼠

目的观察不同浓度淫羊藿苷(icariin,ICA)对IL-1β诱导软骨细胞退变的保护作用。方法原代分离培养新生24 h大鼠四肢长骨干骺端透明软骨的软骨细胞,取P1代细胞,以4×103/孔接种96孔培养板,加入终浓度分别为1×10-7、1×10-6和1×10-5mol/L的ICA,MTT法分别测定12、24、36、48、60、72 h后软骨细胞增殖情况。以1.2×105/孔接种6孔培养板,分别设置空白对照组(N组)、炎症刺激组(M组,加入10 ng/m L IL-1β诱导软骨细胞退变)和淫羊藿苷低、高剂量组(ICA-L组和ICA-H组,炎症刺激组基础上加入ICA,终浓度分别为1×10-7、1×10-6mol/L),连续干预72 h。ELISA法测定培养上清液中Ⅱ型胶原(collagen-Ⅱ,Col-Ⅱ)和糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)含量,RT-PCR法检测细胞Col-Ⅱ、基质金属蛋白酶13(matrix metaloproteinase13,MMP13)、蛋白聚糖(aggrecan,Acan)和Sox9 mRNA表达情况。结果 1×10-5mol/L ICA早期(24 h)表现为抑制软骨细胞增殖(P<0.01),72 h后促进软骨细胞增殖(P<0.01);1×10-7mol/L和1×10-6mol/L ICA干预3672 h后促进软骨细胞增殖(P<0.05),但其中1×10-7mol/L在60 h与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。ICA干预72 h后,与M组比较,ICA-L和ICA-H组,GAG浓度均显著升高(P<0.05),而Col-Ⅱ含量于ICA-L组降低、ICA-H组升高,但差异均无统计学意义(P>0.05)。ICA-L组Acan/Sox9 mRNA表达升高(P<0.01),ICA-H组Col-ⅡmRNA水平升高而MMP13 mRNA表达降低(P<0.01)。结论淫羊藿苷能影响软骨细胞基质微环境,促进软骨细胞表型基因表达,抑制MMP13 mRNA表达,进而拮抗IL-1β诱导的软骨细胞退变。

• 单位
  同济大学附属东方医院; 上海中医药大学; 温州市中西医结合医院