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摘要
目的 细胞外基质（ECM）硬化可促进成纤维细胞活化和纤维化进展。但在放射性肺纤维化（RIPF）早期阶段（胸部照射后2个月），ECM的硬化尚不明显时，ECM的力学特征及对RIPF进展的影响尚不清楚。方法 采用胸部照射法建立小鼠RIPF。制备了脱细胞的肺组织ECM(dECM)，并通过生物原子力显微镜、基质组学、RNAi和点突变等方法检测了其生物力学特性及其对talin-vinculin结合、成纤维细胞活化的影响。结果 与正常肺组织的dECM(dECM-Nor)相比，RIPF早期（照射后2个月）的dECM-RIPF的基质蛋白组成发生了明显变化，同时，dECM-RIPF硬度没有增加(1.44 kPa vs1.35 kPa)，但黏滞力显著增加(85.55 pN vs. 39.35pN)。使用自制的粘弹性水凝胶，我们证明了异常黏滞力可以促进成纤维细胞的活化。将成纤维细胞培养于dECM上，具有异常黏滞力的dECM-RIPF增加了talin1-vinculin的结合，上调了FAK的活化，并增强了成纤维细胞的活化。敲低vinculin可阻碍dECM-RIPF的上述作用，而过表达具有结构激活的vinculin突变体不能自动增加talin1-vinculin结合。采用口咽吸入慢病毒的方式敲低肺组织中vinculin的表达，可减轻RIPF的进展。结论 RIPF的早期基质重塑导致ECM黏滞力增加，异常的黏滞力通过talin1-vinculin结合/FAK磷酸化促进RIPF的进展。
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