应用双抗体夹心ELISA检测产志贺毒素大肠杆菌Ⅱ型志贺毒素

作者：史凤娟; 曾晓燕; 宋路; 史智扬; 郭喜玲; 焦永军

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2016, 36(10): 771-774.

• 产志贺毒素大肠杆菌
• Ⅱ型志贺毒素
• 单克隆抗体
• 双抗体夹心ELISA

目的构建双抗体夹心ELISA检测Ⅱ型志贺毒素(StxⅡ),以利于产志贺毒素大肠杆菌(STEC)感染的临床快速诊断。方法应用业已制备的StxⅡ特异性杂交瘤细胞株,筛选、鉴定最佳抗体配对,构建双抗体夹心ELISA检测体系,对16株STEC临床分离株培养上清中StxⅡ进行检测,并对该体系的特异性和敏感性进行评价。结果从获得的多株单抗分子中,成功筛选出最佳配对抗体S2D8和S2C6,构建基于S2D8/S2C6的双抗体夹心ELISA检测体系,该体系对StxⅡ纯品的检测底限是4 ng/ml,并成功从STEC培养上清中检测出StxⅡ及其变种,而与StxⅠ不结合。其检测效能与商业化胶体金试剂一致,显示出良好的敏感性和特异性。结论 S2D8/S2C6单抗的双抗体夹心法ELISA检测试剂的制备为基于毒素分子作为靶分子的STEC免疫诊断、治疗研究提供基础资料。

• 单位
  南京农业大学; 江苏省疾病预防控制中心