摘要

目的:探讨血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)转染表达血管紧张素II(angiotensinII,AngII)2型受体(angiotensinIItype2receptor,AT2R)后其1型受体(angiotensinIItype1receptor,AT1R)表达所受的影响。方法:用同源重组方法构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV-AT2R),体外转染VSMC,分别用流式细胞仪检测AT1R、AT2R细胞转染表达率、用免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达、以反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)和蛋白印迹法检测其mRNA和蛋白表达。结果:AdCMV-AT2R转染后,随着转染表达时间延长,AT2R细胞表达率呈显著增加趋势,48h最高表达率达89.51%,AngII作用与否及不同浓度AngII作用对AT2R表达无显著影响。而转染前后AT1R表达相对较稳定,受不同浓度AngII作用,其表达明显呈增加趋势。AT2R峰值表达时,免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达结果也提示AT2R表达随转染表达时间延长显著增加,转染前后AT1R表达无明显变化,在一定浓度范围内,AngII刺激对AT2R表达无显著影响,却显著增加AT1R的膜表达。RT-PCR法和蛋白印迹法检测AT1R和AT2R的mRNA和蛋白表达结果与其细胞表达率和膜表达的检测结果相一致。结论:AT2R转染表达并发挥其生物学作用时,对AT1R的表达无明显影响,VSMC转染表达AT2R后,