2株临床分离烟曲霉菌株病原学检测及分子鉴定方法比较与分析

作者：杜伟勤; 王淑峰; 薛婷^*

来源：检验医学与临床, 2021, 18(20): 2937-2941.

• 烟曲霉
• 病原学检测
• 分子鉴定
• 环介导等温扩增

目的对2株临床分离的烟曲霉菌株进行病原学检测和分子鉴定,并对不同检测方法进行比较分析。方法收集2例侵袭性肺曲霉菌病(IPA)患者痰液标本,采用直接压片、亚甲蓝染色和改良GMS染色,以及分离、培养等病原学检测,应用rodA、anxc4、β-tub、ITS、cyp51A和cyp51B基因进行PCR、环介导等温扩增(LAMP)、分子克隆和Sanger测序。结果痰涂片镜检可见典型的烟曲霉鹿角样菌丝、分生孢子头和分生孢子;真菌显色培养基上菌落颜色由白色转为蓝绿色;rodA、anxc4、β-tub、ITS、cyp51A和cyp51B与Genbank数据库中烟曲霉相应序列的同源性均在99.7%以上;LAMP扩增产物肉眼可见白色沉淀,琼脂糖凝胶电泳呈典型梯度条带,HNB可视化检测结果呈淡蓝色,real-time LAMP呈"S"型扩增曲线。结论临床疑似烟曲霉感染时,可通过LAMP进行快速分子鉴定,辅助临床提升诊断效率,为临床治疗提供依据。

• 单位
  吕梁市人民医院; 山西医科大学第一医院